Журнал СФУ. Биология / Биолюминесцентный молекулярный микроанализ на основе аптамерной сенсорики

Полный текст (.pdf)
Номер
Журнал СФУ. Биология. 2019 12 (3)
Авторы
Франк, Л.А.; Башмакова, Е.Е.; Гончарова, Н.С.; Красицкая, В.В.
Контактная информация
Франк, Л.А.: Институт биофизики СО РАН ФИЦ «Красноярский научный центр СО РАН» Россия, 660036, Красноярск, Академгородок, 50/50; Сибирский федеральный университет Россия, 660041, Красноярск, пр. Свободный, 79; Башмакова, Е.Е.: Институт биофизики СО РАН ФИЦ «Красноярский научный центр СО РАН» Россия, 660036, Красноярск, Академгородок, 50/50; Гончарова, Н.С.: Институт биофизики СО РАН ФИЦ «Красноярский научный центр СО РАН» Россия, 660036, Красноярск, Академгородок, 50/50; Сибирский федеральный университет Россия, 660041, Красноярск, пр. Свободный, 79; Красицкая, В.В.: Институт биофизики СО РАН ФИЦ «Красноярский научный центр СО РАН» Россия, 660036, Красноярск, Академгородок, 50/50
Ключевые слова
aptamers; Ca2+-regulated photoprotein obelin; bioluminescent microassay; аптамеры; Са2+-регулируемый фотопротеин обелин; биолюминесцентный микроанализ
Аннотация

Важнейшим качеством аналитической системы, направленной на выявление определенной молекулярной мишени, считается высокая специфичность. Традиционно для этого используют антитела, гаптены и пр. Сравнительно недавно в качестве биоспецифических элементов были предложены аптамеры – короткие одноцепочечные олигонуклеотиды, обладающие уникальной пространственной структурой, благодаря чему способные «распознавать» и специфическим образом связываться с молекулами-мишенями. Аптамеры получают из синтетических рандомных ДНК(РНК)-библиотек, совокупности олигонуклеотидов одинаковой длины с разной последовательностью оснований (1014-1015 вариантов), путем отбора тех, что способны специфическим образом связываться с данной мишенью. Аптамеры стабильны, обладают высокой аффинностью и специфичностью, их можно получать к любым мишеням, в том числе неиммуногенным и токсичным, их легко синтезируют химически. Благодаря этим преимуществам аптамеры часто рассматривают как альтернативу антителам. В данной работе описаны случаи применения аптамерной сенсорики и высокочувствительного биолюминесцентного репортера – Са2+-регулируемого фотопротеина обелина для выявления диагностически важных мишеней в крови пациентов. Этот же репортер предложено использовать при получении новых аптамеров. Разработанный оригинальный биолюминесцентный твердофазный анализ позволяет быстро отслеживать процесс обогащения синтетических библиотек специфичными к данной мишени олигонуклеотидами, оценивать аффинность полученных индивидуальных аптамеров и их укороченных вариантов, а также взаимное расположение аптамеров на молекуле-мишени. Результаты рассмотренных в работе исследований показывают перспективность разработки аналитических систем, включающих, с одной стороны, высокоспецифичную аптамерную сенсорику, а с другой – высокочувствительную детекцию на основе биолюминесцентных репортерных белков

Страницы
244-252
DOI
10.17516/1997-1389-0298
Статья в архиве электронных ресурсов СФУ
https://elib.sfu-kras.ru/handle/2311/125595

Лицензия Creative Commons Эта работа лицензируется по лицензии Creative Commons Attribution-NonCommercial 4.0 International License (CC BY-NC 4.0).